北京中卫永晟科技有限公司
热售电话：13910386853
热售电话：010-65731470
北京中卫永晟科技有限公司
热售电话：13910386853
热售电话：010-65731470
您所在的位置： 首页> 检测知识> 快速检测手册-目录> 食品中大肠菌群的测试片检测
1.适用范围：适用于各类食品、原料和纯净水等样品中大肠菌群的快速测定。
2.方法原理：将乳糖、显色剂和选择性培养基加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。
3.方法特点：与国标法中的九管法相对应，将原来几步的试验简化为一步，时间由78h缩短为24h以内，省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以打开包装进行抽样检测。
4.操作方法：
4.1样品处理：无菌称取样品25g（或25mL）放入含有225mL灭菌生理盐水的采样瓶或均质杯中，经充分振摇做成1：10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1：10样品匀液，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇试管制成1：100的稀释液。以此类推，每个稀释度更换一支灭菌吸管。
4.2接种：选取两个稀释度进行接种，普通食品一般采用1：10和1：100这两个稀释度，饮料和饮用水采用原液和1：10两个稀释度。每份由三片大纸片（接10mL）,六片小纸片（接1mL）组成,大片每小袋二张叠放算作一片。用灭菌吸管吸取10 mL 1：10稀释液加到含有大纸片的塑料袋中（相当于接样品1g），吸透后平放，做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1 mL同一稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中（相当于接样品0.1g），做三个重复。再取一支1 mL灭菌吸管吸取1 mL 1：100稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中（相当于接样品0.01g），做三个重复。
4.3 培养：将接种好的纸片（可叠放）放入37°C培养箱中培养15h～24h。
5.结果判断与计数：若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。如接种的第一个稀释度的稀释液为原液，应将表上查出的结果除以10，以此类推。
6.注意事项：如果样品的酸碱度在pH7以下，应先用灭菌1mol/L氢氧化钠（NaOH）调节溶液调至中性，避免因pH的原因导致的纸片变黄而影响结果观察。
1.检测意义：大肠菌群多存在于温血动物粪便之中。大肠菌群数的有无或高低，代表着食品或食品加工工具被微生物污染的程度。
2.方法说明：
2.1 传统的大肠菌群检验方法：采用样品经乳糖胆盐发酵36℃培养24小时观察，转种在伊红美兰琼脂平板上继续36℃培养18～24小时，挑取可疑菌落进行革兰氏染色来确定大肠菌的阴性或阳性结果。
2.2 新版（2010年版）的国家标准改为：样品经月桂基硫酸胰蛋白胨（LST）肉汤36℃培养24小时后观察，管内产气者需要进行重复发酵实验，管内不产气者继续培养24小时观察，仍然未产气者为阴性结果。如果产气，仍需复发酵实验，即取培养物到煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中继续36℃培养48小时，产气者计为大肠菌阳性管。
2.3 大肠菌群计数纸片方法：采用的是传统的乳糖胆盐发酵原理，即大肠菌群经培养发酵在培养基上出现红紫色斑点，在红紫色斑点的周围局部出现黄色瘢痕，由此判断大肠菌群是否阳性并加以计数。本方法的优点是节省了许多时间（由72小时简约为24小时），省去了大量的辅助性工作。值得注意的是，并非仅仅大肠菌群在纸片方法上呈现阳性反应，其它一些细菌包括某些致病菌也可有此反应现象，也就是说纸片方法得到的是具有推断性意义的结果。
3.国家标准检验方法检索：
1. GB 4789.3—2010食品安全国家标准-食品微生物学检验-大肠菌群计数
