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您所在的位置: 首页> 检测知识> 食物中毒筛查与应急保障监测> 常见食物中毒类型与中毒因子关联表> 大肠O157杆菌
1.适用范围: 用于各类食品以及人体体检样品中大肠杆菌O157:H7的检测。以及突发事件应急检测需要。
2 方法原理: 采用选择性显色培养基作为主要原料,加入专一性酶显色剂,运用微生物测试片技术,做成一次性快速检验产品,通过接种、培养,如果样品中含有大肠杆菌O157:H7,即可在纸片上呈现紫红色的菌落。
3 操作方法
3.1样品处理:
无菌操作取25g(mL)样品放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成样品匀液,静置片刻。
3.2接种:将测试片水平放在台面上,小心揭开上盖膜,用灭菌吸管吸取1 mL样品上清液或增菌液,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min。每个样品接种两片。
3.3培养:将加了样的测试片叠放在一起,放入原来的自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h~24h。
3.4结果观察:对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为大肠杆菌O157:H7;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。
4 附加说明
4.1 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。
4.2注意使用过的纸片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
4.3出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的话至少再取样重复检验一次。
1 检测意义: 肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种新出现的食源性疾病的病原菌。它除引起腹泻、出血性肠炎外,还可发生溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来,肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延,相继在英国、加拿大、日本等多个国家引起腹泻暴发和流行。我国已陆续有十余个省份在市售食品、进口食品、腹泻病患者、家畜家禽等分离到大肠杆菌O157:H7。
2 方法说明: 传统分离鉴定大肠杆菌O157:H7的方法,全过程需时4天~7天。人们一直在寻找着一种快速的检测方法,即尽量不采取增菌步骤,一步培养就可对病原菌进行定性和初筛的方法。目前,从对国内大肠杆菌O157:H7检测纸片的验证结果来看,当样品中含菌10个~99个范围内时可以检出,占平板计数的20%左右,可用于中毒样品中O157:H7的快速筛选。当样品中含菌0个~9个范围内时,纸片无显色反应。因此,当样品中含沙门氏菌量较低的情况时,还应进行增菌操作。
3 方法来源:方法验证使用的测试片由广州天河绿洲生化研究中心提供。