金黄色葡萄球菌的测试片检验方法

1.适用范围： 可用于各类食品和原料中金黄色葡萄球菌的检测以及突发事件应急需要。

2 方法原理： 将选择性培养基中加入专一性的酶显色剂，并将其加载在纸片上，通过培养，如果样品中含有黄色葡萄球菌，即可在纸片上呈现紫红色的菌落。

3 操作方法 3．1样品处理： 无菌操作取25g（25mL）样品放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，充分振摇或置均质器中制成样品匀液，静置片刻。
3．2接种：将测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。每个样品接种两片。
3．3培养：将加了样的测试片叠放在一起，放入原来的自封袋中，堆叠片数不超过12片，透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h～24h。
3．4结果观察：对测试片进行观察，紫红色菌落为金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌，普通大肠杆菌呈蓝色菌落，而溶血性链球菌，沙门氏菌，变形杆菌在试片上不生长。

4 附加说明
4．1山东省疾病预防控制中心的验证结果表明，当金黄色葡萄球菌在0～9个菌落范围内时，测试片与血平板均能检出，作为致病菌不得捡出的标准要求，可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。
4．2 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测，用取样棉签涂抹被测物体表面，放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中，摇晃10s，然后取1mL接种到测试片上。
4．3试验后纸片应及时按生物安全要求进行无害化处理。
4．4出现阳性菌落的样本，最好用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的话至少再取样重复检验一次。

葡萄球菌食物中毒参考资料

(一) 流行病学特点
1.中毒多发生在夏、秋季节，其他季节亦可发生。
2.中毒食品主要为乳及乳制品、蛋及蛋制品、各类熟肉制品，其次为含有乳制品的冷冻食品，个别也有含淀粉类食品。
3.中毒原因主要是被葡萄球菌污染后的食品在较高温度下保存时间过长，如在25～30℃环境中放置5～10小时，就能产生足以引起食物中毒的葡萄球菌肠毒素。

(二)临床表现和预后
1.起病急，潜伏期一般在2～4小时。
2.中毒表现为典型的胃肠道症状，表现为恶心、剧烈地呕吐，(严重者可呈喷射状)、腹痛、腹泻等。
3.年龄越小对本菌肠毒素的敏感性越强。因此儿童发病较多，病情较成人严重。
4.病程较短，一般在1～3天痊愈.很少死亡。

(三)诊断依据
1.符合葡萄球菌食物中毒的流行病学特点和临床表现。
2.从可疑中毒食品中直接检出葡萄球菌肠毒素，并确定其型别。
3.从中毒食品、患者呕吐物或腹泻便中培养检出金黄色葡萄球菌，从分离的菌株培养物中检测出与食品中同一型别的葡萄球菌肠毒素。
4.金黄色葡萄球菌及葡萄球菌肠毒素检验方法按国家标准GB4789·10—94《食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》和行业标准WS／T80—1996《葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则》进行。

(四)治疗原则
1.一般无须特殊治疗。
2.脱水严重者可适当补液。
3.必要时给予抗生素治疗，葡萄球菌对氯霉素、红霉素、青霉素、头孢霉素和氨苄青霉素敏感。
4.对症治疗。

(五)控制和预防
1停止食用可疑中毒食品。
2.控制污染来源。
3.食品加工或消费者要养成良好的卫生习惯，饭前便后洗手。
4.带奶油的糕点及其他奶制品等食品要低温保藏。

葡萄球菌快速检测方法注解

1 检测意义： 金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)是食物中毒最常见的致病菌之一，其侵袭力很强，能产生多种致病物质如：肠毒素、凝固酶等；可引起化脓性炎症、毒素性疾病及葡萄球菌性肠炎。在自然界中普遍存在，食品受其污染的机会很多，人误食了含有毒素的食品，就会发生食物中毒，这已成为世界性的公共卫生问题。我国每年金葡菌引起的食物中毒事件屡有报道，在细菌性食物中毒事件中仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌，对人类健康具有确定危害，对食品中金黄色葡萄球菌进行定性和定量检测具有实际意义。

2 方法说明： 2.1在国家标准中，检验金黄色葡萄球菌的方法需要4天～7天才能得出明确结果，而纸片法不需要增菌步骤，一步24h检测即可达到检测目的。即缩短了时间，简化了检测程序，又省去了许多辅助性工作。
2.2经山东省疾病预防控制中心对广州天河绿洲生化研究中心的产品试验结果显示：纸片的检测结果与国标法相近，在0个～9个菌数范围内纸片与平板均能检出，作为致病菌不得检出的标准要求，可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。

3 方法来源：方法验证使用的测试片由广州天河绿洲生化研究中心提供。
4 国家标准检验方法检索
GB 4789.10—2010食品安全国家标准-食品微生物学检验-金黄色葡萄球菌检验